Кроличья поликлональная антитело против асимметричного диметил-гистона H3-R17 (Q16695/P68431) для Вестерн-блоттинга (WB), иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC), ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация асимметричного диметил-гистона H3-R17

• Гистон H3 является ключевым компонентом нуклеосомы, упаковывая ДНК в хроматин и играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Посттрансляционные модификации (ПТМ) гистонов, известные как "гистоновый код", определяют доступность и функцию хроматина.
• Асимметричное диметиллирование гистона H3 по аргинину 17 (H3R17me2a; соответствует позиции 18 в канонической последовательности UniProt) катализируется белковой аргинин метилтрансферазой CARM1 (коактиватор-ассоциированная аргинин метилтрансфераза 1). Эта модификация ассоциирована с активацией транскрипции и рекрутингом коактиваторных комплексов.
• Как канонический гистон H3.1 (кодируемый множеством генов, таких как H3C1, H3C2 и др.; UniProt P68431), так и тестис-специфичный вариант H3.1t (H3-4; UniProt Q16695) несут эту модификацию. H3.1t экспрессируется в клетках семенников, в то время как H3.1 повсеместно экспрессируется в соматических клетках.
• Гистон H3 локализуется в ядре и преимущественно находится в нуклеосомах вдоль хромосом. N-концевой хвост, где расположен R17, выступает из сердцевины нуклеосомы и является "горячей точкой" для многочисленных ПТМ, регулирующих экспрессию генов.
• Синтетический пептид-иммуноген соответствует первым 100 аминокислотам гистона H3 человека, области, высококонсервативной среди эукариот, что объясняет прогнозируемую широкую перекрестную реактивность данного антитела. Связанные ссылки:
• PMID:15345777
• PMID:15471871
• PMID:16497732
• UniProt Q16695
• UniProt P68431

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать кислотно-экстрагированные гистоны или тотальные клеточные лизаты соответствующих клеточных линий. Ожидаемая молекулярная масса гистона H3 составляет приблизительно 15 кДа. Рассмотрите возможность использования тестов на конкурентное связывание пептидов или образцов с нокаутом CARM1 для подтверждения специфичности детекции асимметричной диметил-R17 модификации.
• В иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) условия фиксации и пермеабилизации существенно влияют на доступность эпитопа. Фиксация метанолом часто усиливает ядерный сигнал; оптимизируйте разведение антител и этапы блокирования для минимизации фона.
• Для ELISA данное антитело может быть использовано с синтетическими пептидами для различения асимметричного диметил-R17 от симметричного диметил- или немодифицированных пептидов H3. Включайте соответствующие контроли для обеспечения специфичности.
• Ввиду прогнозируемой широкой перекрестной реактивности, валидируйте антитело на вашей конкретной модели (вид, ткань) перед применением в критических экспериментах.
• Данное антитело относится к категории "Метилированные антитела" и подходит для эпигенетических исследований. Хотя оно не валидировано здесь для иммунопреципитации хроматина (ChIP) или мультиплексного анализа, его можно интегрировать с другими реагентами, специфичными к модификациям гистонов, для таких применений при соответствующей оптимизации.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и институтам единую платформу для закупки сырья для ИХД, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты оптом. Это антитело против асимметричного диметил-гистона H3-R17 отражает нашу приверженность поставке высококачественных эпигенетических инструментов, поддерживающих открытие биомаркеров, разработку анализов и исследования хроматина. Обращайтесь к нам по вопросам индивидуального поиска редких антител к специфическим модификациям, технических консультаций и беспрепятственной интеграции сырья в ваш диагностический процесс.