Поликлональное антитело кролика Anti-ASMT для вестерн-блоттинга, иммуногистохимии (парафиновые срезы), ELISA - P46597

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ASMT

• ASMT (Ацетилсеротонин-O-метилтрансфераза), также известная как Гидроксииндол-O-метилтрансфераза (HIOMT), является ключевым ферментом, катализирующим финальный этап биосинтеза мелатонина: перенос метильной группы с S-аденозил-L-метионина на N-ацетилсеротонин с образованием мелатонина (N-ацетил-5-метокситриптамина).
• Ген ASMT подвергается альтернативному сплайсингу, что приводит к образованию нескольких транскрипционных вариантов, кодирующих различные изоформы белка.
• На уровне белка ASMT преимущественно экспрессируется в шишковидной железе, где играет критическую роль в регуляции циркадных ритмов и сезонного размножения посредством секреции мелатонина.
• В сетчатке обнаружена очень низкая экспрессия мРНК, но белок ASMT отсутствует, что указывает на тканеспецифичную регуляцию этого фермента. Связанные ссылки: PMID:7989373 PMID:8574683
• ASMT принадлежит к суперсемейству метилтрансфераз и для своей каталитической активности требует S-аденозил-L-метионин в качестве донора метильной группы.
• Белок аннотирован в категории метаболизма липидов, что подчеркивает потенциальную связь между синтезом мелатонина и более широкими метаболическими путями.
• Структурные исследования (подтвержденные аннотациями 3D-структуры) раскрыли архитектуру активного центра фермента, способствуя исследованиям его каталитического механизма и разработке ингибиторов.
• Протеомика на основе масс-спектрометрии подтвердила экспрессию ASMT в шишковидной железе, поддерживая его полезность в качестве биомаркера функции шишковидной железы.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используемый иммуноген представляет собой рекомбинантный фьюжн-белок, покрывающий аминокислоты 1-298 человеческого ASMT (NP_001164510.1). Эта почти полная последовательность, вероятно, генерирует антитела, распознающие множественные линейные эпитопы, что делает ее подходящей для обнаружения денатурированного белка в вестерн-блоттинге.
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P) рассмотрите возможность оптимизации условий демаскировки антигена и разведения антител, так как поликлональные антитела могут демонстрировать более высокий фон в тканях, фиксированных формальдегидом и залитых в парафин.
• В ELISA это антитело может детектировать рекомбинантный или нативный ASMT; однако перекрестную реактивность с другими метилтрансферазами следует валидировать, особенно при тестировании образцов от видов с высокой гомологией последовательностей.
• При использовании этого антитела в тканях мыши или крысы подтвердите перекрестную реактивность с помощью выравнивания последовательностей или предварительного титрования, учитывая, что иммуноген получен из человеческого белка.
• Для вестерн-блоттинга ожидайте полосу примерно на 38 кДа; могут появляться дополнительные полосы, соответствующие изоформам или посттрансляционным модификациям, которые следует проверять с помощью соответствующих контролей.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических систем и исследовательскими лабораториями, чтобы оптимизировать закупку сырья для ИХА, от идентификации лидов до клинического внедрения. Для исследований биосинтеза мелатонина и циркадных ритмов мы предоставляем валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для ускорения разработки анализов. Свяжитесь с нашей командой для получения информации об оптовых ценах, заказе индивидуальных формулировок и поддержке в поиске сырья для редких мишеней.