Кроличьи поликлональные антитела к Anti-ARMET/ARP/MANF для WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA — P55145

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация MANF (ARMET/ARP)

• Мезенцефальный нейротрофический фактор, полученный из астроцитов (MANF), также известный как аргинин-богатый белок (ARMET/ARP), является секретируемым нейротрофическим фактором, который способствует выживанию дофаминергических нейронов и модулирует ГАМК-ергическую передачу в черной субстанции. Связанные публикации: PMID:12794311
• MANF ингибирует пролиферацию клеток и гибель клеток, индуцированную стрессом эндоплазматической сети (ЭПР). В нормальных условиях он удерживается в ЭПР/саркоплазматической сети за счет связывания с шапероном HSPA5/BiP, и секретируется при развитии стресса ЭПР. Связанные публикации: PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• Секретированный MANF связывается с 3-сульфогалактозилцерамидом (сульфатидом) на мембранах клеток-мишеней, стимулируя клеточное поглощение путем эндоцитоза, что необходимо для его функции по снижению стресса ЭПР и клеточной токсичности в гипоксических условиях. Связанные публикации: PMID:29497057
• MANF является необходимым фактором для эмбрионального развития легких, постнатального формирования архитектуры белой пульпы селезенки, энхондрального окостенения и регенерации скелетных мышц, где он регулирует переход макрофагов между фенотипами для подавления воспаления.
• Внутриклеточно в нормальных условиях MANF локализуется в просвете эндоплазматической сети и просвете саркоплазматической сети, и секретируется в ответ на стрессовые воздействия.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, образование дисульфидных связей, фосфорилирование и добавление сиаловой кислоты. MANF участвует в ответе на не свернутые белки (UPR) и сигнальных путях ответа на стресс.
• Мутации в гене MANF ассоциированы с глухотой, сахарным диабетом и карликовостью, что подтверждает разнообразие его физиологических функций.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: антитела получены против рекомбинантного слитного белка, покрывающего аминокислоты 25–182 человеческого MANF, включая участок зрелого полипептида. Данная область высоко консервативна у человека, мыши и крысы, что обеспечивает перекрестную реактивность.
• Вестерн-блоттинг (WB): прогнозируемая молекулярная масса составляет 21 кДа; однако стоит учитывать, что посттрансляционные модификации (например, гликозилирование) могут вызвать небольшое смещение полосы. Обязательно проводите валидацию с соответствующими положительными контролями, а для оценки регулируемой секреции рекомендуется использовать модели индукции стресса ЭПР.
• Иммуногистохимия (IHC-P) и иммуноцитохимия (IF/ICC): из-за секреции MANF и его локализации в ЭПР убедитесь в достаточной пермеабилизации и используйте маркеры ЭПР для исследований колокализации. Для парафиновых срезов оптимизируйте условия демаскировки антигена.
• Иммунопреципитация (IP) и ELISA: поликлональная природа антител обеспечивает высокую эффективность захвата и детекции. Для сэндвич-ИФА рекомендуется использовать сочетание с моноклональным антителом, распознающим другой эпитоп.
• Общее замечание: как и для всех поликлональных антител, в вашей конкретной системе анализа необходимо проверять консистентность результатов между разными сериями. Всегда используйте соответствующие контроль изотипа и отрицательные контрольные образцы.

CamelBio: ваш единый центр по поиску реактивов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам обширный портфель сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, антитела в больших объемах и вспомогательные реагенты. Данное поликлональное антитело к MANF предназначено для исследований нейротрофических факторов и стресса ЭПР, что соответствует нашей миссии по развитию диагностики и разработки терапевтических препаратов. Ознакомьтесь с нашими услугами единого окна по поиску редких мишеней, разработке антител по индивидуальному заказу и техническому консультированию.