Моноклональное антитело против ARF5 для Вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции/ИЦХ, ELISA - P84085

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация ARF5

• ADP-рибозилирующий фактор 5 (ARF5) — это малый GTP-связывающий белок, который циклирует между активным GTP-связанным и неактивным GDP-связанным состояниями, функционируя как молекулярный переключатель во внутриклеточном трафике.
• ARF5 играет ключевую роль в белковом трафике, способствуя отпочковыванию и снятию оболочки с везикул в аппарате Гольджи.
• Он регулирует активность mTORC1, способствуя рекрутированию комплекса mTORC1 к плазматической мембране (ее складкам/ruffles), облегчая активацию через сигнальный путь PI3K/Akt. Связанные ссылки: PMID:36735494
• ARF5 действует как ранний ответчик на повреждение лизосом и участвует в путях контроля качества лизосом. Связанные ссылки: PMID:41293316
• При микробной инфекции ARF5 функционирует как аллостерический активатор каталитической субъединицы холерного токсина, который является ADP-рибозилтрансферазой.
• ARF5 локализован в нескольких клеточных компартментах, включая аппарат Гольджи (мембрана транс-сети Гольджи), клеточную мембрану, цитоплазму (перинуклеарная область) и мембрану лизосом, что отражает его динамическую роль в трафике.
• Это миристоилированный липопротеин, с миристоильной группой, присоединенной к его N-концу, что, вероятно, облегчает ассоциацию с мембраной.
• Расчетная молекулярная масса белка составляет приблизительно 20.5 кДа, и он принадлежит к семейству малых GTPаз ARF.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 81–180 человеческого ARF5, которые консервативны у человека, мыши и крысы; следовательно, антитело может детектировать ARF5 у этих видов, но перекрестную реактивность следует валидировать в соответствующей экспериментальной системе.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ARF5 предсказывается на уровне ~21 кДа; рекомендуется использовать соответствующие позитивные контроли (например, лизаты клеток HeLa, HEK293) и подтверждать специфичность полосы с помощью siRNA или валидации на нокаутных моделях.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) ARF5 локализуется в аппарате Гольджи и цитоплазматических везикулах; условия фиксации и пермеабилизации следует оптимизировать для маркеров Гольджи, рекомендуется совместное окрашивание с маркерами органелл.
• Для ELISA антитело можно использовать в качестве детектирующего или захватывающего реагента; для сэндвич-формата ELISA может потребоваться подбор подходящей пары антител к ARF5.
• Поскольку ARF5 является миристоилированным мембрано-ассоциированным белком, использование экстракционных буферов, содержащих мягкие детергенты, может улучшить растворимость без нарушения распознавания эпитопа.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, включая это моноклональное антитело кролика против ARF5. Помимо антител, мы предлагаем комплексный портфель валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных и поликлональных антител, вспомогательных реагентов в больших объемах, а также поиск сырья для редких мишеней для поддержки ваших исследований в области внутриклеточного трафика и передачи сигналов. Наша модель комплексного обслуживания охватывает все этапы от концепции до клиники, обеспечивая надежные и эффективные поставки для ваших нужд в разработке диагностических систем.