Анти-APTX кроличий поликлональный антитело для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IP, ИФА - Q7Z2E3

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация APTX

• Апратаксин (APTX), также известный как белок, подобный гистидиновому триаду с доменом вилок (FHA-HIT), представляет собой связывающий ДНК белок, участвующий в репарации одноцепочечных разрывов ДНК, репарации двуцепочечных разрывов ДНК и репарации оснований (PubMed:15044383, PubMed:15380105, PubMed:16964241). Он устраняет прерванные промежуточные продукты лигирования ДНК, катализируя высвобождение аденилильных групп с 5'-фосфатных концов, образуя 5'-фосфатные концы, которые могут быть эффективно соединены повторно (PubMed:16964241, PubMed:17276982, PubMed:24362567). Связанные ссылки: PMID:15044383, PMID:15380105, PMID:16964241, PMID:17276982, PMID:24362567

• APTX также гидролизует аденозин 5'-монофосфорамидат (AMP-NH(2)) и диаденозин тетрафосфат (AppppA), хотя и с более низкой каталитической активностью (PubMed:16547001). Он демонстрирует более высокую удельную активность с 5'-связанным аденозином (AppDNA) по сравнению с 3'-связанными аддуктами гуанозина или инозина ДНК (По сходству). Связанные ссылки: PMID:16547001

• Белок локализуется преимущественно в ядре, включая нуклеоплазму и ядрышко, но также обнаруживается в цитоплазме.

• APTX содержит цинк-палец и FHA-домен, для активности которого требуется связывание ионов металла. Он подвергается фосфорилированию (ключевое слово: фосфопротеин).

• Изоформа 1 высоко экспрессируется в коре головного мозга и мозжечке по сравнению с изоформой 2. APTX широко экспрессируется в таких тканях, как печень, почка, лимфатический узел, скелетные мышцы, фибробласты, лимфоциты и поджелудочная железа (PubMed:14755728, PubMed:11586299, PubMed:11586300, PubMed:15276230). Связанные ссылки: PMID:14755728, PMID:11586299, PMID:11586300, PMID:15276230

• Мутации в гене APTX вызывают атаксию с окуломоторной апраксией типа 1 (AOA1), нейродегенеративное расстройство, что подчеркивает его важную роль в репарации ДНК нейронов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (рекомбинантный белок, охватывающий аминокислоты 93-342 человеческого APTX) перекрывает каталитический HIT-домен; таким образом, полученное поликлональное антитело может распознавать обе изоформы. Проверьте обнаружение изоформ в вашей системе образцов.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) предсказанная молекулярная масса составляет 41 кДа, но посттрансляционные модификации могут вызывать небольшие сдвиги. Используйте соответствующие положительные контроли (например, лизаты HeLa, HEK293) и, по возможности, валидируйте с помощью нокдауна siRNA.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) ожидайте ядерное окрашивание с возможным обогащением в ядрышке. Проведите двойное окрашивание с маркером ядрышка (например, фибрилларином) для подтверждения локализации.
• Для иммунопреципитации (IP) антитело может захватывать APTX и его взаимодействующие белки, участвующие в репарации ДНК. Оптимизируйте условия буфера для лизиса (например, концентрация соли, детергент) для сохранения белковых комплексов.
• Применения ИФА могут быть разработаны с использованием рекомбинантного белка APTX или пептида в качестве стандарта. Титруйте антитело для оптимального соотношения сигнал/шум.
• Это антитело валидировано для реактивности с человеческим белком; перекрестная реактивность с другими видами не определена. При использовании образцов не человека рекомендуется выравнивание последовательности области иммуногена.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям комплексное универсальное решение для закупки сырья для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реактивы оптом. Фокусируясь на исследованиях репарации ДНК и нейродегенеративных заболеваний, это анти-APTX антитело демонстрирует нашу приверженность поставкам высококачественного сырья для редких мишеней для ускорения разработки ваших анализов от концепции до клиники. Сотрудничайте с CamelBio для надежных, масштабируемых закупок и экспертной технической поддержки, адаптированной к вашим диагностическим и исследовательским потребностям.