Моноклональное антитело к APOE для ВБ, ИФ/ИКК, ИФА — P02649

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация APOE

• APOE (аполипопротеин E) является основным компонентом плазменных липопротеинов. Его основная функция заключается в липопротеин-опосредованном транспорте липидов между органами через плазму и интерстициальную жидкость; APOE участвует в синтезе, конверсии и клиренсе частиц хиломикронов, ЛОНП, ИЛОНП и ЛВП (PubMed:14754908, PubMed:1911868, PubMed:6860692, PubMed:1917954). Связанные источники: PMID:14754908, PMID:1911868, PMID:6860692, PMID:1917954

• APOE связывается с клеточными рецепторами, включая LDLR, LRP1, LRP2, LRP8 и VLDLR, опосредуя поглощение липопротеиновых частиц, содержащих APOE. Также он обладает гепарин-связывающей активностью, которая поддерживает захват на клеточной поверхности через гепарансульфат-протеогликаны (PubMed:12950167, PubMed:1530612, PubMed:1917954, PubMed:23676495, PubMed:7635945, PubMed:9395455). Связанные источники: PMID:12950167, PMID:1530612, PMID:1917954, PMID:23676495, PMID:7635945, PMID:9395455

• APOE играет ключевую роль в обратном транспорте холестерина, участвуя в биогенезе ЛВП, опосредованном ABCA1, и опосредуя печеночное поглощение ЛВП, тем самым поддерживая гомеостаз холестерина (PubMed:14754908, PubMed:23620513, PubMed:9395455). Связанные источники: PMID:14754908, PMID:23620513, PMID:9395455

• В центральной нервной системе APOE важен для транспорта липидов, регулирует выживание и рост нейронов и может влиять на патогенез болезни Альцгеймера через рецептор-зависимую транскрипционную регуляцию APP (PubMed:25173806, PubMed:8939961, PubMed:28111074). Связанные источники: PMID:25173806, PMID:8939961, PMID:28111074

• APOE секретируется и обнаруживается в внеклеточном пространстве, внеклеточном матриксе и эндосомальных мультивезикулярных телах. Синтезируется преимущественно гепатоцитами печени, но также вырабатывается в мозге (астроцитами, нейронами), надпочечниках, почках, селезенке и жировой ткани (PubMed:25173806, PubMed:10027417, PubMed:3115992). Связанные источники: PMID:25173806, PMID:10027417, PMID:3115992

• APOE участвует в врожденном и адаптивном иммунном ответе, связывается с рецептором иммунных клеток LILRB4 и контролирует выживание миелоидных супрессорных клеток. Также он участвует в инфекции HCV, взаимодействуя с вирусной оболочечной гликопротеином E2 (PubMed:30333625, PubMed:25122793, PubMed:29695434). Связанные источники: PMID:30333625, PMID:25122793, PMID:29695434

• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, фосфорилирование и окисление; APOE подвержен гликации, а его варианты связаны с гиперлипидемией и болезнью Альцгеймера.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является рекомбинантный белок, охватывающий аминокислоты 19–317 человеческого APOE, что покрывает большую часть зрелого белка, включая область связывания с рецептором. Такая конструкция позволяет антителу распознавать как свободные от липидов, так и связанные с липидами конформации APOE.
• При иммуноблоттинге APOE детектируется при кажущейся молекулярной массе ~36 кДа; рекомендуется проводить валидацию на образцах печени, мозга или плазмы, где APOE экспрессируется в высокой степени. Используйте подходящие восстановительные условия, так как APOE может образовывать комплексы, связанные дисульфидными связями.
• При иммунофлуоресценции/ИКК стоит учитывать, что APOE преимущественно секретируется. Возможно, потребуется оптимизация фиксации и пермеабилизации для визуализации внутриклеточного пула, поэтому рекомендуется ко-окрашивание маркерами органелл (например, ЭПР, аппарата Гольджи или эндосом).
• При ИФА APOE можно количественно определить в сыворотке/плазме или супернатантах клеточных культур; однако высокие эндогенные уровни в сыворотке могут потребовать оптимизации разведения и тщательного построения стандартной кривой.
• Учитывая роль изоформ APOE в развитии заболеваний, исследователям следует рассмотреть проведение изоформ-специфической валидации, если антитело распознает общие эпитопы. Данное антитело получено против референсной последовательности (NP_000032.1), которая соответствует изоформе APOE3.

CamelBio: ваш универсальный партнер по закупкам

CamelBio выступает как комплексный партнер по снабжению сырьем для ИВД для производителей диагностических препаратов и исследовательских институтов, предоставляя удобный доступ к валидированным парам антител, оптимизированным моноклональным/поликлональным антителам, вспомогательным реагентам в больших объемах и поиску редких мишеней. Данное моноклональное антитело к APOE является примером нашего расширенного портфолио для исследований липидного обмена и нейродегенеративных заболеваний, поддерживая применение от открытия биомаркеров до разработки тест-систем. Используйте универсальную цепочку поставок CamelBio для ускорения разработки ваших диагностических продуктов при поддержке технических консультаций и решений для индивидуального производства.