Поликлональное кроличье антитело Anti-APLF для WB, ELISA — Q8IW19

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация APLF

• APLF действует как шаперон гистонов, необходимый для репарации одноцепочечных и двуцепочечных разрывов ДНК.
  Связанные публикации: PMID:17353262, PMID:17396150, PMID:21211721
• Он рекрутируется в участки повреждения ДНК посредством связывания с разветвлёнными цепями поли-АДФ-рибозы, где способствует удалению гистонов и рекрутированию варианта гистона MACROH2A1.
  Связанные публикации: PMID:21211722, PMID:29905837, PMID:30104678
• APLF обладает активностью эндонуклеазы апуриновых-апиримидиновых (AP) участков и 3'-5'-экзонуклеазы, а также может в условиях in vitro вносить одноцепочечные разрывы в участки повреждения гидроксиурацила и других пиримидиновых оснований.
  Связанные публикации: PMID:17353262, PMID:17396150
• В пути негомологичного соединения концов (NHEJ) APLF взаимодействует с PARP3, удерживая комплекс LIG4-XRCC4 на хроматине и ускоряя лигирование ДНК.
  Связанные публикации: PMID:21211721, PMID:23689425
• APLF негативно регулирует плюрипотентность клеток, способствуя обмену гистонов, и необходим для имплантации эмбриона в ходе эпителиально-мезенхимального перехода у самок.
• На субклеточном уровне APLF локализуется в ядре, хромосомах и цитоплазме/цитозоле, что соответствует его функциям в репарации ДНК и регуляции хроматина.
• Структурные мотивы включают домен FHA, повторы цинковых пальцев, а также сайты фосфорилирования и АДФ-рибозилирования, подчёркивая его роль в зависящих от сигналов ответах на повреждение ДНК.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• При проведении вестерн-блоттинга в образцах человеческого происхождения ожидается полоса около 57 кДа; для подтверждения детекции включите положительный контроль, например рекомбинантный иммуноген (аа 200–380).
• Поскольку наблюдалась перекрёстная реактивность с белком крысы, валидируйте антитело на лизатах клеток или тканей крысы, если в исследовании используются модели грызунов.
• Для применения в ELISA нанесение рекомбинантного фрагмента APLF в качестве покрытия может повысить специфичность сигнала; условия анализа следует оптимизировать эмпирически.
• Учитывая ядерную и цитоплазматическую локализацию APLF, рассмотрите возможность субклеточного фракционирования для обогащения образца целевым белком и более чувствительной детекции методом WB.
• Поскольку APLF участвует в ответе на повреждение ДНК, обработка агентами, повреждающими ДНК, может усилить рекрутирование белка к хроматину; эксперименты с временными точками могут выявить динамические изменения локализации.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по подбору продуктов

Данное поликлональное антитело к APLF входит в комплексную линейку CamelBio для исследований репарации ДНК и стабильности генома. В качестве специализированного партнёра по сырьевым материалам для IVD CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты и индивидуальный подбор продуктов для редких мишеней, помогая ускорить путь от фундаментальных исследований до клинического применения.