Кроличье моноклональное антитело против APAF1 для вестерн-блоттинга (WB) и ELISA - O14727

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация APAF1

• APAF1 (Apoptotic protease-activating factor 1), также известный как CED4 или APAF-1, кодируется геном APAF1 (KIAA0413) и существует в виде множественных изоформ благодаря альтернативному сплайсингу.
• Белок функционирует как центральный компонент апоптосома, где олигомерный APAF1 опосредует цитохром c-зависимую автопротеолитическую активацию про-каспазы-9, что впоследствии активирует каспазу-3 для запуска апоптоза; этот процесс требует связывания АТФ.
• APAF1 является мультидоменным белком, содержащим N-концевой домен рекрутирования каспаз (CARD), центральный нуклеотид-связывающий и олигомеризационный домен (NOD) и C-концевые WD40-повторы, критически важные для связывания цитохрома c.
• На субклеточном уровне APAF1 в норме преимущественно локализуется в цитоплазме, а при индукции апоптоза перемещается в комплекс апоптосома.
• Экспрессия повсеместная, с наивысшими уровнями, обнаруженными в селезенке взрослого организма, лейкоцитах периферической крови, фетальном мозге, почках и легких; изоформа 1 специфично обнаруживается в сердце, почках и печени.
• Белок подвержен регуляции через связывание АТФ/дАТФ и, вероятно, кальций-опосредованной регуляции, как указано в ключевых словах, и содержит WD-повторы, необходимые для белок-белковых взаимодействий.
• Ключевые слова: 3D-структура, Альтернативный сплайсинг, Апоптоз, АТФ-связывание, Кальций, Цитоплазма, Прямое секвенирование белка, Нуклеотид-связывание, Идентификация протеомикой, Референсный протеом, Повтор, WD-повтор.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 470-600 человеческого APAF1 (центральный регион NOD), что обеспечивает детекцию полноразмерных и укороченных вариантов, однако специфичность следует проверять в соответствующих клеточных моделях.
• При вестерн-блоттинге учитывайте, что APAF1 мигрирует на нескольких молекулярных массах (38-142 кДа) из-за разнообразия изоформ и расщепления каспазами; паттерн полос может варьироваться в зависимости от типа клеток и апоптотических стимулов.
• Для ELISA можно использовать калибровочную кривую на основе рекомбинантного APAF1; включайте соответствующие положительные (например, лизаты клеток Jurkat, обработанные стауроспорином) и отрицательные контроли для валидации специфичности анализа.
• Перекрестная реактивность с мышиным APAF1 ожидается на основе гомологии последовательностей, но рекомендуется эмпирическое подтверждение на мышиных тканях или клеточных линиях.
• Рекомендуется оптимизация разведения антител, условий инкубации и детекционных реагентов для каждой экспериментальной системы.

CamelBio: Ваш универсальный мост для снабжения

CamelBio — ваш комплексный партнер по снабжению сырьем для IVD, предоставляющий валидированные антитела, пары антигенов и вспомогательные реагенты от этапа открытия до коммерческих масштабов. Данное моноклональное антитело против APAF1 поддерживает исследования апоптоза и разработку диагностических тестов, с возможностью надежных крупнооптовых поставок и технических консультаций. Для редких мишеней или индивидуальных решений CamelBio использует глобальные сети для эффективного преодоления разрывов в снабжении.