Моноклональное кроличье антитело к AP2S1 для ВБ и ИФА – P53680

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологические предпосылки: функция и локализация AP2S1

• Ген AP2S1 кодирует сигма-субъединицу адапторного белкового комплекса 2 (AP-2) – гетеротетрамерного комплекса, необходимого для клатрин-опосредованного эндоцитоза на плазматической мембране. Белок также известен под названиями AP17, CLAPS2, сигма2-адаптин и ассоциированный с клатриновой оболочкой белок AP17.
• Как основной компонент AP-2, сигма-субъединица участвует в селективном привлечении трансмембранного груза в клатрин-обволакиваемые везикулы (КоВ), распознавая сигналы эндоцитоза Y-X-X-Φ и [ED]-X-X-X-L-[LI] в цитозольных хвостах грузовых белков.
• AP-2 выполняет функцию основного клатринового адаптора, соединяя клатриновую решетку с мембранными компонентами для запуска формирования везикул и сортировки груза. Также он участвует в рециклинге мембран синаптических везикул с пресинаптической поверхности.
• Из четырех субъединиц (α, β2, μ2, σ2) именно сигма-субъединица участвует в стабилизации комплекса и распознавании ди лейциновых мотивов сортировки.
• Субклеточно AP2S1 локализуется на клеточной мембране и в обволакиваемых ямках, что соответствует его роли на ранних стадиях эндоцитоза.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование (согласно данным UniProt), а альтернативный сплайсинг приводит к образованию различных изоформ.
• AP2S1 также может участвовать в поддержании внеклеточного гомеостаза кальция, хотя эта функция изучена недостаточно.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном для этого антитела послужил синтетический пептид, соответствующий N-концевой области (аминокислоты 1–100) человеческого AP2S1. Эта область, вероятно, находится на поверхности белка и обеспечивает хорошую доступность эпитопа. При необходимости рекомендуется провести эксперименты с пептидным блокированием для подтверждения специфичности связывания.
• Для вестерн-блота (ВБ) предсказанная молекулярная масса составляет около 17 кДа. Убедитесь, что вы используете гель с подходящей концентрацией акриламида (например, 12–15%) и корректные условия переноса для белков низкой молекулярной массы. Проведите валидацию антитела в вашей конкретной матрице образцов, поскольку посттрансляционные модификации или варианты изоформ могут влиять на характер полос.
• Антитело перекрестно реагирует с мышью, поэтому оно подходит для исследований на мышиных моделях и клеточных линиях. Для ИФА можно использовать прямой или непрямой формат с соответствующим покрытием антигена. Рекомендуется проведение титрования и оптимизации условий для каждого конкретного анализа.
• Учитывая роль AP-2 в эндоцитозе, это антитело может быть полезно для исследования трафика грузовых белков, интернализации рецепторов и динамики синаптических везикул. Для изучения локализации и функциональной активности комбинируйте его использование с маркерами органоидов и функциональными анализами.

CamelBio: ваш универсальный шлюз для закупки реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам упрощенный доступ к широкому ассортименту сырья для производства ИВД. Для проектов, посвященных эндоцитозу, мембранному трафику или адапторным белковым комплексам мы можем поставить валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и сырье для редких мишеней. Наша служба закупок и техническая поддержка помогают преодолеть разрыв между идеей и клиническим применением, обеспечивая эффективную разработку диагностических тестов и исследовательских инструментов.