Кроличья поликлональная антитела против ALG13 для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q9NP73

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ALG13

• ALG13 является каталитической субъединицей комплекса UDP-N-ацетилглюкозаминтрансферазы, также известной как аспарагин-связанная гликозилтрансфераза 13 гомолог или белок, содержащий гликозилтрансферазный домен 28. Она опосредует второй этап биосинтеза долихол-связанного олигосахарида на цитоплазматической стороне эндоплазматического ретикулума.
• Вместе со своим обязательным партнером ALG14, ALG13 формирует димерный комплекс, который переносит β1,4‑связанный N‑ацетилглюкозамин (GlcNAc) с UDP‑GlcNAc на GlcNAc‑пирофосфатдолихол, генерируя N,N′‑диацетилхитобиозил дифосфодолихол. Этот промежуточный продукт впоследствии удлиняется ALG1 и другими гликозилтрансферазами.
• Комплекс ALG13/ALG14 заякорен на мембране эндоплазматического ретикулума, где собирается предшественник долихол-связанного олигосахарида перед его "переворотом" в просвет ЭР для дальнейшей обработки и последующего переноса на nascent полипептиды.
• Хотя на основании мотивов последовательности (домены тиол-протеазы, гидролазы) аннотирован как потенциальный мультифункциональный фермент, для ALG13 не была обнаружена гликозилтрансферазная или деубиквитиназная активность вне ее роли в переносе GlcNAc. Ее дополнительные биохимические активности, если таковые имеются, остаются слабо охарактеризованными.
• Мутации в гене ALG13 связаны с врожденным нарушением гликозилирования типа Is (CDG1S) и ранними инфантильными эпилептическими энцефалопатиями (DEE36, EIEE36), что отражает критическую важность этого фермента для нормального нейроразвития и глобального N гликозилирования белков.
• Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ ALG13, и белок подвергается убиквитинированию (путь конъюгации Ubl), что может регулировать его стабильность или функцию.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• В качестве иммуногена использован синтетический пептид, охватывающий остатки 100–167 человеческого ALG13 (изоформа NP_001311219.1). Этот эпитоп консервативен в ALG13 мыши, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность с образцами мыши.
• Для Вестерн-блоттинга валидируйте специфичность антител, включая положительные контроли, такие как клеточные линии человека или мыши, известные экспрессией ALG13, и рассмотрите эксперименты с нокдауном siRNA или сверхэкспрессией для подтверждения полосы ~126 кДа.
• Для изучения функционального комплекса ALG13/ALG14 рассмотрите коиммунопреципитацию или анализ лигирования близости в сочетании с детекцией обеих субъединиц.
• В применениях ИФА используйте рекомбинантный белок ALG13 или иммунизирующий пептид в качестве иммобилизованного антигена для построения калибровочных кривых и титруйте антитело соответствующим образом для оптимального соотношения сигнал/шум.
• Поскольку ALG13 является мембрано-ассоциированным белком, убедитесь, что лизирующие буферы содержат достаточное количество детергентов (например, 1% Triton X‑100 или NP‑40) для эффективной солюбилизации фракции мембраны ЭР.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по снабжению сырьевыми материалами для ИВД, соединяя производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории с качественными антителами, такими как эти поликлональные антитела против ALG13, для исследований в области гликобиологии и CDG. Помимо отдельных реагентов, мы поддерживаем оптовые закупки валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител и вспомогательных компонентов для анализа, а также предлагаем разработку на заказ для редких мишеней и технические консультации для оптимизации вашего рабочего процесса от концепции до клиники.