Поликлональные антитела против 53BP1 для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИФА (ELISA) - Q12888

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация белка 1, связывающего TP53

• 53BP1, также известный как p202, TDRD30 или p53BP1, является ключевым белком репарации двунитевых разрывов (DSB), участвующим в ответе на повреждение ДНК, динамике теломер и переключении классов (CSR) в процессе генерации антител. Связанные ссылки: PMID:12364621 PMID:17190600 PMID:21144835

• Он способствует репарации DSB посредством негомологичного соединения концов (NHEJ) и специфически противодействует репарации гомологичной рекомбинацией (HR), зависимой от BRCA1. Связанные ссылки: PMID:22553214 PMID:23333306 PMID:23727112

• При повреждении ДНК фосфорилирование 53BP1, опосредованное ATM, способствует его взаимодействию с RIF1 и диссоциации от TIRR, что облегчает рекрутирование в места разрывов DSB. Связанные ссылки: PMID:28241136

• 53BP1 рекрутируется в места DSB за счет распознавания гистона H2A, монубиквитинированного по K15 (H2AK15Ub), и гистона H4, диметилированного по K20 (H4K20me2). Связанные ссылки: PMID:17190600 PMID:23760478 PMID:27153538

• Он необходим для переключения классов иммуноглобулинов (CSR), процесса, который приводит к образованию DSB в ДНК. Связанные ссылки: PMID:23345425

• 53BP1 также способствует NHEJ на дисфункциональных теломерах за счет взаимодействия с PAXIP1. Связанные ссылки: PMID:23727112

• На субклеточном уровне 53BP1 локализуется в ядре, на хромосомах, а конкретно — в центромерах и кинетохорах.

• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ 53BP1, что вносит вклад в функциональное разнообразие в процессах репарации ДНК.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Как поликлональные антитела, полученные против рекомбинантного фрагмента (а.к. 895-1031), они, как ожидается, будут распознавать全长ный белок 53BP1 (~214 кДа) и, возможно, продукты деградации при вестерн-блоттинге. Оптимизируйте время экспозиции и контроли загрузки.
• Для WB типичный начальный диапазон разведений 1:500–1:2000 часто используется для поликлональных антител; однако оптимальная рабочая концентрация должна быть определена эмпирически в вашей системе образцов.
• В IHC-P может потребоваться демаскировка антигенов из-за ядерной локализации 53BP1; проверьте специфичность окрашивания с помощью соответствующих тканевых контролов и рассмотрите возможность использования ядерного контрастного красителя.
• Антитела демонстрируют перекрестную реактивность с мышиным и крысиным 53BP1, что подтверждено поставщиком, что делает их полезными для трансляционных исследований; однако следует учитывать выравнивание последовательностей области иммуногена у разных видов.
• Поскольку 53BP1 является фосфопротеином, участвующим в передаче сигнала о повреждении ДНК, обработка клеток повреждающими ДНК агентами (например, ионизирующим излучением, этопозидом) может усилить обнаружение образования фокусов в иммунофлуоресценции или изменить сигнал в WB.
• Для ИФА (ELISA) антитела можно использовать для захвата или обнаружения рекомбинантных фрагментов 53BP1 или лизатов клеток; соответствующие условия блокировки и отмывки должны быть оптимизированы.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по закупкам для производителей IVD и исследовательских лабораторий, предлагая валидированные пары антител, вспомогательные реактивы оптом и редкие сырье для мишеней. Эти поликлональные антитела против 53BP1 поддерживают исследования путей репарации повреждений ДНК и биологии хроматина — две области, в которых портфель CamelBio может ускорить разработку анализов. Свяжитесь с нами, чтобы изучить комплексные решения по поставкам, охватывающие все этапы от открытия мишеней до клинической диагностики.