Кроличье поликлональное антитело к Acetyl-p53-K382 (P04637) для дот-блоттинга и ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация клеточного опухолевого антигена p53 (TP53)

Клеточный опухолевый антиген p53 (TP53) — это многофункциональный фактор транскрипции, играющий центральную роль в подавлении опухолей, индуцируя остановку клеточного цикла, репарацию ДНК или апоптоз в ответ на клеточный стресс. Он действует как «страж генома», негативно регулируя деление клеток, контролируя экспрессию ключевых генов-мишеней, включая ингибиторы циклин-зависимых киназ. Опосредованный p53 апоптоз включает стимуляцию экспрессии BAX и антигена FAS или репрессию Bcl-2, а его проапоптотическая активность модулируется взаимодействиями с белками семейства ASPP. Кроме того, p53 регулирует циркадные ритмы, репрессируя CLOCK-BMAL1-опосредованную транскрипцию гена PER2. Связанные ссылки: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:24051492

p53 локализуется в нескольких внутриклеточных компартментах в зависимости от своего состояния активации и изоформы. Он преимущественно ядерный, но также может находиться в цитоплазме, в ядерных тельцах PML, митохондриях, эндоплазматическом ретикулуме и центросоме. Транслокация в митохондрии происходит при окислительном стрессе или обработке митомицином C, где p53 взаимодействует с PPIF для активации некроза. Связанные ссылки: PMID:15340061, PMID:17170702, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:22726440, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 экспрессируется повсеместно, но его изоформы демонстрируют тканезависимые вариации. Изоформа 2 отсутствует в головном мозге, легких и предстательной железе, в то время как изоформа 8 ограничена толстой кишкой, костным мозгом, семенниками, фетальным мозгом и кишечником. Связанные ссылки: PMID:16131611

p53 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, которые регулируют его стабильность и активность. Ацетилирование по лизину 382 (K382) катализируется ацетилтрансферазами, такими как p300/CBP, и усиливает связывание p53 с ДНК и транскрипционную активацию. Эта модификация может быть обращена деацетилазами, а K382 также может быть метилирована или диметиллирована, что подчеркивает сложность регуляторной сети. Связанные ссылки: PMID:10656795, PMID:15448695, PMID:20228809, PMID:23431171, PMID:29681526, PMID:19608861, PMID:17707234, PMID:20870725, PMID:22864287

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический ацетилированный пептид, соответствующий участку вокруг K382 человеческого белка p53. Ожидается, что антитело будет специфично распознавать ацетилированную форму; перекрестную реактивность с немодифицированным пептидом или другими модификациями в этом сайте следует проверить.
• Для дот-блоттинга рассмотрите возможность использования денатурированных белковых образцов или пептидов, нанесенных на мембраны. Для ELISA может подойти иммобилизация пептида-иммуногена или полноразмерного белка p53.
• Поскольку поликлональные антитела могут демонстрировать различия от партии к партии, валидируйте специфичность антитела в вашей экспериментальной системе с использованием соответствующих контролей (например, конкуренция с неацетилированным пептидом или лизаты клеток, обработанных ингибиторами деацетилаз, такими как трихостатин А).
• Индукцию ацетилирования p53 можно достичь, обрабатывая клетки повреждающими ДНК агентами (например, доксорубицином, этопозидом) перед подготовкой образцов.
• Антитело доставляется в пакетах со льдом. По получении разлейте его по аликвотам и храните при –20°C или ниже для долгосрочной стабильности. Избегайте повторных циклов замораживания-оттаивания.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio служит комплексным партнером для закупок сырья для IVD, предлагая производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный доступ к обширному портфолио антител, антигенов и вспомогательных реагентов. Это кроличье pAb к Acetyl‑p53‑K382 нацелено на критическую посттрансляционную модификацию опухолевого супрессора p53, что делает его ценным инструментом для исследований в области онкологии, апоптоза и клеточного цикла. Помимо этого продукта, CamelBio может поставлять валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также осуществлять поиск сырья для редких мишеней, поддерживая весь ваш процесс разработки анализов — от концепции до клиники.