Кроличья моноклональная антитело к ацетилированному p53 (K370) (P04637) для вестерн-блота и ИФА

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация p53 (TP53)

p53 (клеточный опухолевый антиген p53, TP53) — это хорошо изученный белок-супрессор опухолей, который функционирует как многофункциональный фактор транскрипции. При связывании с целевыми последовательностями ДНК он индуцирует остановку клеточного цикла, репарацию ДНК или апоптоз, тем самым поддерживая геномную стабильность и предотвращая развитие рака (PubMed:11025664, 12524540, 12810724, 15340061, 17317671, 24051492).

Связанные литературы: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:17317671, PMID:24051492

Исследования субклеточной локализации показывают, что в нормальных условиях p53 преимущественно находится в ядре, но в ответ на различные клеточные стрессы может транслоцироваться в цитоплазму, митохондрии, тела PML и эндоплазматическую сеть. Такая динамическая компартментализация критически важна для его разнообразных функций, включая регуляцию транскрипции и индукцию апоптоза (PubMed:15340061, 22726440, 11025664, 12810724, 17170702, 25168243, 27323408, 28842590).

Связанные литературы: PMID:15340061, PMID:22726440, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:17170702, PMID:25168243, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 широко экспрессируется в большинстве тканей, при этом несколько изоформ имеют отличающиеся паттерны экспрессии. Основная изоформа 1 экспрессируется повсеместно, тогда как другие изоформы демонстрируют тканеспецифическое присутствие или отсутствие, что добавляет сложности в регуляцию этого белка (PubMed:16131611).

Связанные литературы: PMID:16131611

Активность p53 строго контролируется за счет обширных посттрансляционных модификаций (ПТМ), включая фосфорилирование, ацетилирование, метилирование и убиквитинирование. Лизин 370 (K370) в C-концевой регуляторной области является горячей точкой для таких модификаций: он подвергается метилированию и диметилированию под действием ферментов таких как SMYD2 и других, что модулирует стабильность и транскрипционную активность p53. Данная антитела получена с использованием синтетического ацетилированного пептида участка K370 человеческого p53 (P04637) и специфично распознает ацетилированную форму этого остатка. Ацетилирование K370 связано с усилением связывания с ДНК и активацией генов-мишеней p53, что связывает эту модификацию с подавлением опухолевого роста.

Связанные литературы: PMID:17108971, PMID:22864287 (по метилированию/диметилированию по положению K370)

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитела получены у кролика и являются моноклональными, что гарантирует высокую специфичность и стабильность характеристик между партиями.
• Для вестерн-блота рекомендуется обогащение экстрактов ядерных белков, поскольку p53 преимущественно локализован в ядре; однако в зависимости от условий клеточного стресса p53 может также присутствовать в цитоплазматических или митохондриальных фракциях.
• Для валидации проводите тестирование в положительных контрольных образцах, с известной экспрессией ацетилированного p53 — например, в клетках, обработанных ингибиторами деацетилаз (такими как трихостатин А или никотинамид) или агентами, повреждающими ДНК (такими как этопозид, доксорубицин).
• При использовании ИФА покрывайте планшет иммуногенным пептидом (ацетилированным) и неацетилированным контрольным пептидом для подтверждения специфичности связывания.
• Перекрестная реактивность подтверждена для человека и мыши, но при тестировании других видов рекомендуется предварительное выравнивание последовательностей.
• Оптимальные рабочие разведения подбираются эмпирически; рекомендуемые начальные разведения для ВБ: 1:500‑1:2000, для ИФА: 1:1000‑1:5000 (титрование выполняет конечный пользователь).

CamelBio: ваш универсальный мост для закупки реагентов

CamelBio — ваш комплексный партнер по поиску сырья для ИВД, предлагающий универсальное решение от идеи до клинических исследований. Мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и специализированные материалы по редким мишеням для поддержки ваших диагностических и исследовательских проектов. Данная кроличья моноклональная антитела к ацетилированному p53 (K370) (P04637) является высококачественным инструментом для исследований апоптоза и рака, что отражает наше стремление поставлять важнейшие реагенты для изучения механизмов подавления опухолевого роста. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы упростить закупки и ускорить реализацию ваших проектов.