Кроличья поликлональная антитело к ацетилированному HMGB1 (Lys29) (P09429) для ВБ, ИФ/ИКК, ИФА

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация белка высокой подвижности B1 (HMGB1)

• HMGB1 — это высокообильный, конститутивно экспрессируемый негистоновый хромосомный белок, который функционирует как ДНК-шаперон, регулируя транскрипцию, репликацию, репарацию ДНК и стабильность генома. Он также действует как внеклеточный молекулярный паттерн, ассоциированный с повреждением (DAMP), при травмах и воспалении. Связанные источники: PMID:33147444, PMID:27362237

• Субклеточная локализация HMGB1 динамически регулируется. В базальных условиях белок преимущественно находится в ядре, но постоянно перемещается между ядром и цитоплазмой. При определенных стимулах или стрессе он подвергается посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование ключевых остатков лизина в сигналах ядерной локализации (NLS1: а.к. 28–44, NLS2: а.к. 179–185), что способствует накоплению белка в цитоплазме и его активной секреции по неконвенциональному пути, опосредованному лизосомами. Связанные источники: PMID:12231511, PMID:17114460

• Ацетилирование по остатку Lys29 (K29) является одной из нескольких критических модификаций, регулирующих транспорт HMGB1. Гиперацетилирование области NLS1, включая K29, нарушает ядерный импорт и облегчает перемещение HMGB1 в цитоплазму с последующим высвобождением во внеклеточное пространство, где белок проявляет цитокиноподобную активность. Связанные источники: UniProt P09429

• Во внеклеточном пространстве редокс-статус HMGB1 определяет его функцию: полностью восстановленный HMGB1 действует как хемокин, дисульфидный HMGB1 как цитокин, а окисленный HMGB1 способствует иммунологической толерантности. Внеклеточный HMGB1 связывается с рецепторами такими как RAGE, TLR2 и TLR4 для активации врожденных иммунных ответов, что делает его критическим медиатором сепсиса, аутоиммунных заболеваний и рака. Связанные источники: PMID:23446148, PMID:23519706

• HMGB1 также играет роль в микробном патогенезе, облегчая проникновение SARS-CoV-2 и других вирусов, и регулирует аутофагию и активацию инфламмасомы. Связанные источники: PMID:35239449, PMID:22696656

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Учитывая обратимый характер ацетилирования, добавьте ингибиторы деацетилаз (например, трихостатин А, никотинамид) в лизирующие буферы для сохранения ацетилированного HMGB1 при приготовлении образцов.
• При иммуноблоттинге ожидаемая молекулярная масса HMGB1 составляет ~25 кДа, но посттрансляционные модификации могут вызвать небольшое смещение полосы. Используйте клетки в ранней логарифмической фазе или стимулированные клетки в качестве положительного контроля.
• При иммунофлуоресценции/ИКК сигнал ацетил-HMGB1-K29 после индукции ацетилирования (например, обработкой ЛПС) преимущественно определяется в цитоплазме или во внеклеточном пространстве, в отличие от ядерного окрашивания в покоящихся клетках.
• Для применения в ИФА рассмотрите возможность использования этого антитела в качестве захватывающего или детектирующего реагента в паре с пан-антителом к HMGB1 для специфического количественного определения ацетилированного HMGB1 в биологических жидкостях.
• Перекрестная реактивность с HMGB1 мыши и крысы подтверждена, однако рекомендуется проводить валидацию в конкретной системе образцов.

CamelBio: ваш универсальный мост для закупки реагентов

CamelBio является надежной универсальной платформой для закупки сырья для ИВД, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также объемные поставки вспомогательных реагентов для производителей диагностики и исследовательских лабораторий. Данное кроличье поликлональное антитело к ацетил-HMGB1-K29 является примером нашей ориентации на высококачественные реагенты, специфичные к посттрансляционно модифицированным мишеням, которые подходят для исследований в области воспаления, онкологии и инфекционных заболеваний. По вопросам индивидуальных спецификаций, крупномасштабных поставок или подбора дополнительных реагентов, пожалуйста, свяжитесь с нашей командой технической поддержки.