Ацетилированный гистон H4 K91, поликлональные антитела кролика (P62805) – Вестерн-блоттинг (WB), ИФ/ИЦХ, ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация гистона H4

Гистон H4 — один из основных гистонов, образующих нуклеосому — фундаментальную единицу хроматина. Вместе с H2A, H2B и H3 он наматывает ДНК на гистоновый октамер, уплотняя геном и регулируя доступ для транскрипции, репликации и репарации. Гистон H4 играет центральную роль в динамической регуляции структуры хроматина посредством широкого спектра посттрансляционных модификаций (PTM), collectively known as the "histone code." Эти модификации включают ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, убиквитинирование и многие другие, которые происходят преимущественно на N-концевом хвосте, но также и в глобулярном домене.

Ацетилирование специфических остатков лизина гистона H4 связано с транскрипционной активацией и открытой структурой хроматина. Лизин 91 (K91), расположенный в глобулярном домене H4, является одним из таких остатков, которые могут быть ацетилированы. Было показано, что ацетилирование K91 (соответствует K92 в изоформе UniProt P62805) регулирует динамику хроматина и может влиять на процессы репарации ДНК. Связанные ссылки: PMID:19818714

Высокая консервативность гистона H4 у эукариот обеспечивает то, что специфичные к ацетилированию антитела, такие как эти анти-ацетил-H4-K91, проявляют широкую перекрестную реактивность, что делает их ценными инструментами для эпигенетических исследований у различных видов. H4 преимущественно локализован в ядре, связан с хромосомами и присутствует на протяжении всего клеточного цикла, при этом специфические паттерны ацетилирования изменяются во время дифференцировки и развития. Связанные ссылки: UniProt P62805

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (WB) используйте обогащенные гистонами ядерные экстракты или экстрагированные кислотой гистоны для улучшения обнаружения. Рассмотрите возможность включения отрицательного контроля, такого как неацетилированный пептид, или обработки ингибитором деацетилазы (например, TSA) для подтверждения специфичности к ацетилированной форме K91. Предполагаемый молекулярный вес гистона H4 составляет примерно 11 кДа, но миграция может незначительно отличаться в зависимости от PTM.
• При иммунофлуоресценции / иммуноцитохимии (IF/ICC) оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации (например, фиксация 4% PFA или метанолом, затем 0,1% Triton X-100) для сохранения эпитопа. Совместное окрашивание красителями для ДНК (например, DAPI) может подтвердить ядерную локализацию.
• Для применения в ИФА используйте синтетический ацетилированный пептид K91 в сравнении с немодифицированным пептидом в качестве покрывающих антигенов для оценки специфичности и титра антител. Предполагается, что эти антитела перекрестно реагируют с мышью, крысой и другими видами из-за высокой гомологии последовательности гистона H4, но проверьте это в вашей экспериментальной системе.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio — это специализированный партнер по комплексным закупкам сырья для IVD, поддерживающий производителей диагностических средств, исследовательские лаборатории и институты от концепции до клинического применения. Для удовлетворения ваших потребностей в исследованиях модификаций гистонов и эпигенетики мы предоставляем эти высококачественные поликлональные антитела кролика против ацетил-гистона H4-K91, а также валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и поиск редкого целевого сырья. Позвольте CamelBio оптимизировать вашу цепочку поставок и ускорить ваши диагностические и исследовательские проекты.