Кроличье моноклональное антитело к ацетилгистону H4-K16 (P62805) для применения в ВБ, ЧиП и ИГК-П

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H4

• Основной компонент нуклеосомы: Гистон H4 является фундаментальным структурным элементом нуклеосомы — основной повторяющейся единицы хроматина. Он обеспечивает упаковку ДНК, регулируя доступ к генетическому материалу, и играет центральную роль в процессах транскрипции, репарации ДНК, репликации и поддержании стабильности хромосом. Динамическое состояние хроматина регулируется сложной системой посттрансляционных модификаций («гистонный код») и ремоделирования нуклеосом. Связанные источники: UniProt P62805

• Субклеточная локализация: Гистон H4 преимущественно локализован в ядре и является основным компонентом хромосом. Ацетилированные формы, включая модификацию по K16, обнаруживаются в специфических ядерных структурах, в том числе в ядрах удлиняющихся сперматид. Связанные источники: UniProt P62805

• Посттрансляционные модификации и ацетилирование K16: Гистон H4 подвергается большому количеству модификаций, в первую очередь по остаткам лизина. Ацетилирование по лизину 16 (K16, соответствует положению 17 в обработанной последовательности UniProt) является критической эпигенетической меткой. Эта модификация ассоциирована с открытым хроматином и транскрипционно активными регионами. Она динамически регулируется гистонацетилтрансферазами (ГАТ) и деацетилазами (ГДА) и распознается белками, содержащими бромодомены, что модулирует экспрессию генов. Связанные источники: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген этого антитела представляет собой синтетический ацетилированный пептид в области K16 гистона H4 человека, что обеспечивает специфичность к ацетилированной форме. Всегда используйте соответствующие контроли (например, конкуренция неацетилированным пептидом или антитело к общему гистону H4) для подтверждения специфичности в вашей экспериментальной системе.
• При вестерн-блоттинге (ВБ) ожидается получение одной полосы с молекулярной массой около 11 кДа. Для снижения неспецифического связывания рекомендуется оптимизировать количество загружаемого материала и условия блокировки.
• При иммунопреципитации хроматина (ЧиП) необходимо тщательно оптимизировать условия сшивания и разрезания хроматина. Антитело может быть пригодно как для нативного, так и для сшитого ЧиП; необходимо валидировать извлечение известных геномных участков с ацетилированным K16.
• При иммуногистохимии на парафиновых срезах (ИГК-П) методы демаскировки антигена и разведение антитела подбираются эмпирически. Прогнозируемая широкая перекрестная реактивность (с людьми, мышью, крысой и другими видами) делает это антитело универсальным инструментом, однако картину окрашивания следует проверять с использованием соответствующих биологических контролей.
• Высокая эволюционная консервативность гистона H4 объясняет прогнозируемую широкую видовую реактивность. Тем не менее, мы рекомендуем валидировать антитело для вашей конкретной модели вида и ткани из-за возможных различий в фиксации или обработке образцов.

CamelBio: ваш универсальный поставщик для лабораторных исследований

CamelBio предоставляет производителям диагностических препаратов и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, техническим услугам и консультационной поддержке — от идеи до клинических испытаний. Это кроличье моноклональное антитело к ацетилгистону H4-K16 является примером нашей приверженности поставке валидированных инструментов для эпигенетических исследований хроматина. Помимо отдельных антител, мы предлагаем полный портфель продуктов, включающий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и поиск редких целевых сырьевых материалов. Все наши решения разработаны для ускорения разработки тест-систем и производственных процессов.