Ацетил-Гистон H4-K16 (P62805) Кроличья поликлональная антитело для Вестерн-блоттинга и ИФА – Эпигенетические исследования

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация гистона H4

• Основной компонент нуклеосомы: Гистон H4 является одним из четырех core-гистонов, образующих октамер нуклеосомы, вокруг которого наматывается ДНК, образуя хроматин. Эта фундаментальная структура ограничивает доступность ДНК и тем самым регулирует транскрипцию, репарацию ДНК, репликацию и хромосомную стабильность. Связанные ссылки: UniProt P62805
• Субклеточная локализация: В стационарных условиях гистон H4 в основном обнаруживается в ядре, тесно связанный с хромосомами. Ацетилирование, например в позиции K16, влияет на его динамическую локализацию; например, ацетилированный H4 наблюдается в локализации в ядре на стадии 11 сперматид. Связанные ссылки: UniProt P62805
• Посттрансляционные модификации и гистоновый код: Гистон H4 подвергается множеству посттрансляционных модификаций (PTM) на своем N-концевом хвосте, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, убиквитинирование и различные ацильные метки (например, кротонилирование, бутирилирование, сукцинилирование). Эти модификации составляют «гистоновый код», который управляет структурой хроматина и экспрессией генов. Ацетилирование специфических остатков лизина, включая K16, является отличительной чертой транскрипционно активного эухроматина. Связанные ссылки: UniProt P62805
• Функциональное значение ацетилирования K16: Ацетилирование H4 по лизину 16 (H4K16ac) особенно критично для укладки хроматина высшего порядка и транскрипционной регуляции. Эта модификация нейтрализует положительный заряд лизина, нарушая межнуклеосомные взаимодействия и способствуя открытой конформации хроматина. Она участвует в компенсации дозировки, репарации повреждений ДНК и клеточном старении. Связанные ссылки: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861 (общее ацетилирование гистонов)
• Эволюционная консервативность: Аминокислотная последовательность гистона H4 замечательно консервативна у эукариот, от дрожжей до человека, что лежит в основе широкого диапазона предсказанной перекрестной реактивности этого антитела. Связанные ссылки: UniProt P62805

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Соображения по дизайну иммуногена: Антитело было получено против синтетического ацетилированного пептида, соответствующего остаткам, окружающим лизин 16 человеческого гистона H4. Этот дизайн обеспечивает специфичность к ацетилированному состоянию K16; однако, перекрестная реактивность с немодифицированным H4 или другими ацетилированными лизинами должна быть оценена в вашей экспериментальной системе.
• Рекомендации по Вестерн-блоттингу (WB): При выполнении WB рассмотрите возможность использования экстрактов гистонов из цельных клеток или кислотных экстрактов гистонов из клеток человека, мыши или крысы, так как предсказана широкая перекрестная реактивность. Из-за небольшого молекулярного веса (~11 кДа) используйте 15% SDS-PAGE или градиентные гели для оптимального разрешения. Проверьте специфичность, сравнивая сигналы с неацетилированными контрольными образцами или используя ингибиторы деацетилаз (например, TSA, бутират натрия) для подтверждения связывания с мишенью.
• Применения ИФА (ELISA): Это антитело может быть подходящим для обнаружения ацетилированных пептидов H4 или очищенных гистонов методом ИФА. Подтвердите оптимальные концентрации антигена для покрытия и рассмотрите возможность блокировки буферами, не содержащими фосфо/ацетил групп, для снижения фона.
• Перекрестная реактивность видов: Предсказана широкая перекрестная реактивность на основе высокой эволюционной консервативности последовательности гистона H4. Хотя сообщалось, что антитело реагирует с образцами человека, мыши и крысы, рекомендуется верификация для других видов из-за потенциальных различий в PTM.
• Общая техническая заметка: Как и в случае со всеми специфичными к PTM антителами, убедитесь, что подготовка образца минимизирует эндогенную активность деацетилаз (например, включите ингибиторы HDAC в лизисный буфер) для сохранения сигнала ацетилирования.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

Как ваш надежный партнер по реагентам для IVD полного цикла, CamelBio соединяет производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории с критически важными реагентами, такими как кроличье pAb к ацетил-гистону H4-K16, для ускорения эпигенетических исследований и исследований хроматина. Помимо этого поликлонального антитела, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты оптом, адаптированные под ваш рабочий процесс. Нужны ли вам редкие специфичные к PTM антитела или крупномасштабные закупки основных реагентов для гистонов, наша интегрированная цепочка поставок гарантирует неизменное качество и техническую поддержку от концепции до клиники.