Ацетил-Гистон H4 (K12) Кроличье Поликлональное Антитело для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИКК, ИФА - P62805

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: Функция и локализация Гистона H4

Гистон H4 - один из четырех коровых гистонов, формирующих нуклеосому, фундаментальную повторяющуюся единицу хроматина. Будучи высококонсервативным структурным белком, он играет важнейшую роль в упаковке и организации ДНК в ядре, напрямую влияя на экспрессию генов, репликацию ДНК, репарацию и хромосомную стабильность.

Связанные ссылки: UniProtKB P62805

Функция Гистона H4 динамически регулируется множеством посттрансляционных модификаций (ПТМ), в совокупности называемых "гистоновым кодом". Ацетилирование специфичных остатков лизина, включая лизин 12 (K12, соответствует K13 в UniProt P62805), является ключевой эпигенетической меткой, которая модулирует структуру хроматина и способствует активной транскрипции. Ацетилирование в этом остатке задокументировано в многочисленных исследованиях.

Связанные ссылки: PMID:17967882 PMID:2474456 PMID:7664735 PMID:19608861

Субклеточная локализация Гистона H4 преимущественно ядерная, где он ассоциирован с хромосомной ДНК. Специфичные паттерны ацетилирования, такие как в K12, могут влиять на динамику его локализации во время процессов, например, сперматогенеза.

Связанные ссылки: UniProtKB P62805

Структурно белок Гистона H4 имеет молекулярную массу приблизительно 11,4 кДа и кодируется множественными копиями генов (например, H4C1, H4C2 и т.д.), которые производят идентичную белковую последовательность. Эта множественность обеспечивает высокий уровень экспрессии, необходимый для сборки хроматина. Из-за чрезвычайной эволюционной консервативности последовательности Гистона H4 у разных видов антитела, нацеленные на этот белок, часто демонстрируют широкую перекрестную реактивность.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Это антитело получено против синтетического ацетилированного пептида вокруг K12. Для специфичного детектирования учтите, что антитело может предпочтительно распознавать ацетилированную форму; валидация с образцами, обработанными ингибитором деацетилаз, может усилить сигнал.
• Вестерн-блоттинг (WB): Гистон H4 имеет низкую молекулярную массу (~11 кДа). Используйте 15% или градиентные гели SDS-PAGE и обеспечьте эффективный перенос (например, ночной влажный перенос при низком напряжении), чтобы предотвратить потерю мелких белков. Включайте соответствующие маркеры молекулярной массы и при необходимости подтверждайте специфичность с помощью конкурентных анализов с неацетилированным пептидом.
• Иммуногистохимия (ИГХ-П) и Иммунофлуоресценция (ИФ/ИКК): Восстановление антигена (например, цитратным буфером, pH 6.0) может улучшить доступность эпитопа. Используйте позитивные контрольные ткани с активной транскрипцией или пролиферацией (например, семенники, тимус) и рассмотрите возможность блокирования эндогенного биотина или пероксидаз в соответствии со стандартными протоколами.
• ИФА: Для количественного анализа покрывайте планшеты ацетилированным пептидом H4 или гистоновыми экстрактами и проверяйте специфичность пептида с использованием неацетилированных контролей.
• Перекрестная реактивность: Предполагается, что антитело обладает перекрестной реактивностью с ацетилированным Гистоном H4 человека, мыши, крысы и многих других видов. Валидируйте в вашей экспериментальной системе, чтобы исключить связывание с неацетилированным H4 или другими ацетилированными белками, особенно учитывая поликлональную природу антитела.
• Альтернативные подходы: Если требуется высокая специфичность только к метке ацетил-K12, рассмотрите использование в паре с моноклональным антителом или применение сайт-специфичных конкурентных анализов для подтверждения распознавания эпитопа.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio служит надежным, универсальным партнером по поставкам для производителей диагностических систем, лабораторий и исследовательских институтов, нуждающихся в высококачественных сырьевых материалах для ИВД. Это кроличье поликлональное антитело к ацетил-Гистону H4-K12 представляет собой один из многих специализированных реагентов, которые мы поставляем для поддержки эпигенетических исследований и исследований хроматина. Помимо отдельных антител, мы можем предоставить валидированные пары антител, оптимизированные панели моноклональных и поликлональных антител, объемные вспомогательные реагенты и индивидуальные поставки сырья для редких мишеней, помогая оптимизировать разработку ваших анализов от концепции до клиники.