Ацетил-Гистон H3 (Lys4) Кроличий моноклональный антитело для WB, ChIP, IF | Q16695/P68431

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и гистон H3 и его локализация

• Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, которая упаковывает и уплотняет ДНК в хроматин. Это ограничивает доступность ДНК для клеточных механизмов, требующих ДНК в качестве матрицы, тем самым играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Связанные ссылки: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• Доступность ДНК регулируется сложным набором посттрансляционных модификаций (PTM) гистонов, collectively termed the "histone code," and nucleosome remodeling. Эти PTM включают ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование, АДФ-рибозилирование и различные ацилирования. Связанные ссылки: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:17194708

• Гистон H3 локализуется преимущественно в ядре и связан с хромосомами на протяжении всего клеточного цикла. Связанные ссылки: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• В то время как канонический гистон H3.1 (кодируемый несколькими генами, например, HIST1H3A) экспрессируется широко, вариант H3.1t (H3-4, HIST3H3) экспрессируется специфически в клетках яичек, что указывает на специализированные роли в организации хроматина во время сперматогенеза. Связанные ссылки: UniProtKB Q16695

• Ацетилирование лизина 4 на гистоне H3 (H3K4ac) — это хорошо охарактеризованная модификация, связанная с активными промоторами и открытым хроматином. Она часто сосуществует с другими активирующими метками и считывается белками, содержащими бромодомен, для содействия транскрипционной активации.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический ацетилированный пептид, соответствующий остаткам в области K4 гистона H3 человека. Из-за высокой консервативности N-концевого хвоста среди видов прогнозируется перекрестная реактивность с образцами мыши и крысы; однако рекомендуется проверить работоспособность в конкретной экспериментальной модели.

• Для анализов ChIP рассмотрите возможность проверки специфичности антитела с помощью ацетилированных и неацетилированных конкурирующих пептидов для подтверждения обогащения в целевых локусах.

• При вестерн-блоттинге гистон H3 мигрирует с молекулярным весом примерно 15 кДа. Оптимизируйте процент геля и условия переноса для низкомолекулярных белков; для усиления сигнала рекомендуются ядерные или экстрагированные кислотой лизаты белков.

• Для иммунофлуоресценции протестируйте различные протоколы фиксации (например, 4% PFA против метанола) и пермеабилизации, так как они могут влиять на доступность эпитопа и фон.

• Учитывая широкий спектр модификаций на N-конце H3, убедитесь, что обнаружение не затрагивается соседними PTM, используя соответствующие контроли и, по возможности, мутантные гистоны или рекомбинантные белки.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, исследовательским лабораториям и академическим институтам эффективный комплексный доступ к премиальным реагентам для IVD. Наш портфель включает валидированные пары антител и оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела для критически важных эпигенетических мишеней, таких как ацетил-Гистон H3-K4, а также вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких или труднодоступных исходных материалов. Независимо от того, нужно ли вам перейти от концепции к клинике или масштабировать разработку анализов, мы связываем вас с надежными решениями для поставок, адаптированными к вашему рабочему процессу.