Кроличьи поликлональные антитела к ацетилированному гистону H3-K9/K14/K18/K23/K27 (Q16695/P68431) для ВБ, ИФ/ИКК, ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы — фундаментальной повторяющейся единицы хроматина. Как часть гистонового октамера он играет ключевую роль в упаковке и компактизации ДНК, ограничивая доступность ДНК для клеточных машин, использующих ДНК в качестве матрицы. Эта структурная основа позволяет гистонам осуществлять центральную регуляцию транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и стабильности хромосом.

N-концевой хвост гистона H3 подвергается многочисленным посттрансляционным модификациям (ПТМ), включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование и другие, которые формируют сложный «гистоновый код». Эти модификации динамически регулируют архитектуру хроматина и экспрессию генов. В частности, известно, что ацетилирование по лизиновым остаткам 9, 14, 18, 23 и 27 нейтрализует положительный заряд лизинов, ослабляя взаимодействие между гистонами и ДНК. Это приводит к формированию более открытой конформации хроматина (эвухроматина) и тесно связано с активацией транскрипции. Ацетилированные метки на этих сайтах распознаются белками, содержащими бромодомен, и ремоделерами хроматина, что облегчает рекрутинг транскрипционного механизма. Связанные источники:

• PMID:16627869
• PMID:19608861

Гистон H3 в основном локализован в ядре и на хромосомах, где он включается в состав хроматина во время репликации ДНК (для зависимых от репликации вариантов, таких как H3.1) или независимо от репликации (для замещающих вариантов). Канонический белок H3.1 (кодируемый несколькими генами, включая HIST1H3A–J) экспрессируется во многих тканях, а тестис-специфический вариант H3.1t (H3-4, кодируемый геном HIST3H3) обнаруживается в клетках яичка. Оба варианта имеют консервативную последовательность N-концевого хвоста, содержащую ацетилированные лизины, на которые направлено данное антитело.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический ацетилированный пептид, охватывающий участки K9, K14, K18, K23 и K27 человеческого гистона H3. Такая мультисайтовая конструкция позволяет широко детектировать гиперацетилированный H3; рекомендуется проверять специфичность с использованием контрольных неацетилированных пептидов в конкурентных анализах.
• Для вестерн-блоттинга экстракция гистонов кислотой или фракционирование с обогащением хроматином позволяет улучшить отношение сигнал/шум; рекомендуется нормализация загрузки с использованием антитела к общему гистону H3 для учета возможного маскирования эпитопа другими ПТМ.
• При иммунофлуоресценции/ИКК пермеабилизация Тритоном X-100 или дигитонином может улучшить проникновение антитела в ядро; для достижения баланса между доступностью эпитопа и сохранением морфологии необходимо оптимизировать условия фиксации.
• При использовании ИФА рекомендуется включать покрытие как ацетилированными, так и неацетилированными пептидами для подтверждения селективного связывания.
• Предсказанная перекрестная реактивность с человеческими, мышиными, крысиными и другими видами предполагает возможность использования этого антитела в различных модельных системах; тем не менее, валидация в конкретной системе образцов и экспериментальном контексте является обязательной.

CamelBio: ваш универсальный мост по поиску реагентов

CamelBio предлагает производителям диагностики, лабораториям и исследовательским институтам оптимизированную универсальную платформу для закупки сырья для ИВД (in vitro диагностики). Данное антитело к ацетилированному гистону H3 является частью нашего портфеля реагентов, сфокусированного на эпигенетике и хроматине, дополняя нашу возможность поставлять валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные реагенты, объемные партии вспомогательных материалов и антитела к редким модификациям. Свяжитесь с нашей командой, чтобы обсудить, как мы можем поддержать вашу разработку и производство ИВД — от концепции до клинических исследований — с помощью интегрированных технических решений и решений для цепочки поставок.