Кроличья поликлональная антитело к ацетил-истонам H3-K23 (Q16695/P68431) для WB, ChIP, IHC-P, IF/ICC, ИФА

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосом — фундаментальных повторяющихся единиц хроматина. Нуклеосомы упаковывают и уплотняют ДНК, ограничивая доступ клеточных машин, которые используют ДНК как матрицу. Благодаря этой структурной роли гистоны играют центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. Доступность ДНК динамически модулируется сложным набором посттрансляционных модификаций (ПТМ), объединенных под названием гистоновый код, а также ремоделированием нуклеосом.

Ацетилирование лизина 23 (K23) N-концевого хвоста гистона H3 является важной ПТМ, которая способствует деконденсации хроматина и активации генов. В некоторых системах нумерации этот сайт соответствует K24 из-за отщепления инициирующего метионина. Многочисленные исследования выявили ацетилирование K23 в различных клеточных контекстах, связывая его с открытыми состояниями хроматина и регуляцией транскрипции.

Связанные источники: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16457588

Белок гистон H3.1 (кодируется генами H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 и HIST1H3A) обычно локализован в ядре и на хромосомах. Специфичная для семенников изоформа H3.1t (Q16695) экспрессируется в клетках семенников, тогда как канонический H3.1 (P68431) экспрессируется повсеместно. Оба варианта имеют консервативный сайт ацетилирования K23.

Гистон H3 подвергается множеству других ПТМ, включая метилирование, фосфорилирование, цитруллирование и другие ацилирования, которые тонко регулируют функцию хроматина. Специфичность антитела к ацетилированной форме K23 позволяет точно изучать эти регуляторные механизмы.

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Это антитело получено против синтетического ацетилированного пептида, соответствующего остаткам вокруг K23 гистона H3 человека. Из-за высокой консервативности данной последовательности прогнозируется перекрестная реактивность с широким спектром видов; всегда проводите подтверждение на ваших образцах.
• При вестерн-блоттинге (WB) ожидается полоса размером около 15 кДа. Рекомендуется загружать соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, клетки, обработанные ингибиторами гистондеацетилаз, по сравнению с необработанными) для подтверждения ацетилирование-зависимого сигнала.
• При иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) может потребоваться оптимизация антигенного восстановления и блокировки; при наличии возможности проверяйте специфичность с использованием пептидной конкуренции или клеточных линий с нокаутом.
• При иммунопреципитации хроматина (ChIP) обеспечьте правильное сшивание и фрагментацию. Добавляйте контроль неспецифической IgG и тестируйте разные концентрации антитела. Согласно данным поставщика, это антитело подходит для ChIP.
• При использовании ИФА и других методов необходима валидация в соответствующей системе образцов. Чувствительность и специфичность могут варьироваться в зависимости от анализа.
• Как и для любых антител к сайт-специфическим модификациям, консистентность результатов может зависеть от партии; всегда титруйте антитело и определяйте оптимальную рабочую разведение.

CamelBio: ваш универсальный поставщик научных реагентов

CamelBio оказывает поддержку производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и институтам, предлагая широкий ассортимент сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты. Это антитело к ацетил-гистону H3-K23 идеально подходит для эпигенетических исследований и проектов по разработке анализов. Независимо от того, нужны ли вам большие объемы поставок, подбор антител к редким мишеням или комплексные решения по сырью, CamelBio обеспечивает удобный процесс закупки от идеи до клинических испытаний.