Кроличье моноклональное антитело к ацетилированному гистону H3 (K23) (Q16695 / P68431) для WB, IF/ICC, ИФА

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация гистона H3

Архитектура хроматина и стабильность генома: Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, необходимым для упаковки ДНК в хроматин. Он играет ключевую роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. Динамическая ремоделировка нуклеосом определяет доступность ДНК для транскрипционного аппарата и других регуляторных факторов. Связанные источники: UniProt Q16695/P68431

Ядерная и хромосомная локализация: Гистон H3 преимущественно находится в ядре и тесно ассоциирован с хромосомами на протяжении всего клеточного цикла, что обеспечивает его структурные и регуляторные функции. Связанные источники: UniProt Q16695/P68431

Разнообразие изоформ: Геном человека кодирует несколько вариантов гистона H3. Идентификаторы SWISS Q16695 (H3.1t) и P68431 (канонический H3.1) соответствуют изоформе со специфической тканевой экспрессией и ультраэкспрессируемой изоформе соответственно. H3.1t специфически экспрессируется в клетках семенников, тогда как H3.1 присутствует во всех тканях. Связанные источники: UniProt Q16695/P68431

Пост-трансляционные модификации (PTM): Гистон H3 подвергается большому количеству пост-трансляционных модификаций, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование и цитруллинацию, которые в совокупности формируют «гистоновый код». Ацетилирование по лизину 23 (H3K23ac) является специфической модификацией, которая модулирует структуру хроматина и экспрессию генов, аналогично другим хорошо изученным сайтам ацетилирования, таким как K19 и K24. Связанные источники: PMID:19608861

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Проверка специфичности: Поскольку иммуногеном является ацетилированный пептид области K23, ожидается, что антитело распознает именно ацетилированный гистон H3 по остатку K23 (H3K23ac). Для подтверждения специфичности необходимо включить подходящие контроли, например блокинг неацетилированным пептидом или обработку ингибиторами деацетилаз.
• Приготовление образца: Для вестерн-блоттинга оптимальный сигнал часто получают с использованием лизатов, обогащенных гистонами (например, гистонов, выделенных кислотной экстракцией). Рекомендуется протестировать разные методы экстракции для оценки эффективности детекции в вашей конкретной модельной системе.
• Перекрестная реактивность: Производитель указывает на предсказанную широкую перекрестную реактивность (человек, мышь, крыса, другие виды), но рекомендуется провести независимую валидацию для вашего целевого вида и типа образца.
• Настройка ИФА: При разработке ИФА используйте ацетилированный пептид H3K23 в качестве стандарта или положительного контроля. При необходимости для формата сэндвич-ИФА можно использовать паре с захватывающим антителом к пан-гистону H3.
• Иммунофлуоресценция (IF/ICC): Оптимизируйте этапы фиксации и пермеабилизации для сохранения доступности эпитопа. Совместное окрашивание с антителом к общему гистону H3 позволяет подтвердить локализацию и специфичность окрашивания.
• Общее примечание: Все предложенные протоколы являются отправной точкой; эмпирическая оптимизация необходима для достижения наилучших результатов в вашем конкретном эксперименте.

CamelBio: ваш универсальный источник реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный универсальный подход к закупке сырья для ИВД и поддержке разработок. Для исследований в области эпигенетики и биологии хроматина, включая детекцию ацетилирования гистона H3 по остатку K23, мы предлагаем доступ к широкому портфелю валидированных клонов антител, оптимизированным моноклональным и поликлональным антителам, а также вспомогательным реактивам в больших объемах. Независимо от того, нужны ли вам готовые пары антител, рецептура по индивидуальному заказу или помощь в поиске редких мишеней, наша команда упрощает ваш путь от концепции до клинических испытаний благодаря надежным решениям для масштабируемых поставок.