Кроличье поликлональное антитело к ацетилгистону H3 (K14) | Q16695 / P68431 | ВБ, ИФ/ИКК, ИФА

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация ацетил-гистона H3 (K14)

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, упаковывая ДНК в компактную структуру хроматина. Это ограничивает доступ транскрипционного аппарата к ДНК, регулируя таким образом транскрипцию, репарацию ДНК, репликацию и стабильность хромосом. Посттрансляционные модификации гистонов, объединенные понятием «гистоновый код», модулируют структуру и функцию хроматина.

Основные сведения:

• Ацетилирование лизина 14 (K14ac) гистона H3 — это хорошо изученная модификация, ассоциированная с транскрипционно активным хроматином. Она добавляется гистонацетилтрансферазами такими как GCN5/PCAF и удаляется гистондеацетилазами. Вероятно, K14ac способствует релаксации хроматина, нейтрализуя положительный заряд лизина и уменьшая взаимодействие гистона с ДНК.

Ссылки на литературу: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588

• Гистон H3 в основном локализован в ядре и хромосомах. Канонический гистон H3.1 (кодируется несколькими генами, SWISS P68431) является репликационно-зависимым и экспрессируется на протяжении всего клеточного цикла. В отличие от него, тестис-специфичный вариант H3.1t (SWISS Q16695) экспрессируется в клетках семенников и замещает канонический H3.1 во время сперматогенеза.

Характеристика антитела:

• Данное антитело получено против синтетического ацетилированного пептида, соответствующего остаткам вокруг K14 гистона H3.1 человека (NP_003520.1). Оно распознает ацетилированную форму лизина 14 как изоформы H3.1, так и H3.1t, что позволяет изучать K14ac в различных биологических контекстах.

Ссылки на литературу: PMID:19608861

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Вестерн-блот (ВБ): Для оптимального детектирования ацетилирования гистона H3 K14 рекомендуется обогатить препарат гистонов путем кислотной экстракции из клеток, обработанных ингибиторами гистондеацетилаз (например, трихостатин А, бутират натрия) для повышения уровня ацетилирования. Для разделения используйте 15%-ный гель SDS-PAGE. Специфичность антитела можно подтвердить конкурентным ингибированием ацетилированным пептидом или сравнением сигналов в образцах дикого типа и обработанных ингибитором HDAC.
• Иммунофлуоресценция/ИКК: Фиксируйте клетки 4%-ным параформальдегидом и пермеабилизируйте 0,1%-ным Тритоном X-100. Также допускается фиксация метанолом. Для подтверждения специфичности ядерного окрашивания используйте соответствующие контроли, например конкурентное ингибирование пептидом.
• ИФА: Используйте антитело для детектирования ацетилированных пептидов гистона H3 в твердофазных анализах. Для нормализации используйте парное пан-H3 антитело.
• Предсказана реактивность антитела с широким спектром видов из-за высокой консервативности последовательности в области K14, тем не менее рекомендуется проводить валидацию на образцах других видов кроме человека, мыши и крысы.

CamelBio: ваш единый центр подбора сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам доступ к сырью для ИВД, техническим услугам и консалтингу в формате «одного окна» — мы покрываем все этапы от идеи до клинических испытаний. Для исследователей, изучающих эпигенетическую регуляцию и модификации гистонов, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах. Мы занимаемся поиском даже редкого сырья для целевых разработок, обеспечивая вас всеми необходимыми инструментами — как это ацетил-гистон H3 (K14) антитело — для вашего конвейера разработки анализов. Сотрудничество с CamelBio позволяет оптимизировать процесс ИВД-исследований и производства диагностических препаратов.