Ацетил-DNMT1 (K1127/K1129/K1131/K1133) Кроличье поликлональное антитело (P26358) для IHC-P, IF/ICC, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ДНК (цитозин-5)-метилтрансферазы 1

DNMT1 — критически важная ДНК-метилтрансфераза, ответственная за поддержание паттернов метилирования CpG во время репликации ДНК, обеспечивая эпигенетическое наследование. Она предпочтительно метилирует гемиметилированную ДНК и ассоциируется с очагами репликации в S-фазе, но также действует независимо от репликации в фазах G2 и M, сохраняя глобальный ландшафт метилирования. Опосредованное DNMT1 сайленсирование включает прямое взаимодействие с HDAC2 и формирование корепрессорных комплексов, которые модулируют гистоновые модификации и экспрессию генов. Ссылки на литературу: PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743, PMID:10888872, PMID:24623306

Фермент локализуется преимущественно в ядре и рекрутируется в хроматин в очагах репликации через свой RFTS-домен, который распознает убиквитинированный гистон H3. Он также локализуется в перинуклеолярных областях, что отражает специализированные функции в поддержании гетерохроматина. Ссылки на литературу: PMID:12145218, PMID:24492612, PMID:29053958

DNMT1 экспрессируется повсеместно, с особенно высоким уровнем в фетальных тканях, сердце, почках, плаценте и мононуклеарных клетках периферической крови, и более низкой экспрессией в селезенке, легких, мозге, тонком кишечнике, толстой кишке, печени и скелетных мышцах. Ссылки на литературу: PMID:10325416

Посттрансляционные модификации DNMT1, особенно ацетилирование, играют ключевую регуляторную роль. Кластер лизинов, на который нацелено это антитело (K1127/K1129/K1131/K1133 в изоформе 1), соответствует известным сайтам ацетилирования (K1111/K1113/K1115/K1117/K1119/K1121 в канонической последовательности), которые модифицируются гистоновыми ацетилтрансферазами и могут влиять на стабильность белка, его локализацию и взаимодействие с другими эпигенетическими факторами. Ссылки на литературу: PMID:21947282, PMID:19608861

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это кроличье поликлональное антитело было получено против синтетического ацетилированного пептида, охватывающего K1127, K1129, K1131 и K1133 человеческого DNMT1. Ожидается, что оно специфически распознает ацетилированную форму белка.
• Для IHC-P могут потребоваться стандартные методы демаскировки антигена (например, тепловая демаскировка в цитратном буфере, pH 6.0) для экспозиции эпитопа. Оптимальное разведение антитела и условия инкубации следует определять эмпирически.
• При выполнении IF/ICC обычно используется фиксация 4% параформальдегидом с последующей пермеабилизацией 0.1% Triton X-100; однако эти этапы необходимо валидировать в конкретной клеточной или тканевой системе.
• ELISA можно использовать для обнаружения и количественного определения уровней ацетилированного DNMT1 в клеточных лизатах или тканевых экстрактах. Рассмотрите возможность использования конкурентного анализа с пептидом для подтверждения специфичности связывания.
• Поскольку DNMT1 широко экспрессируется, включайте соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, ткани или клеточные линии с известным статусом ацетилирования) для проверки паттернов окрашивания.
• Предсказанная молекулярная масса составляет 183 кДа; если антитело используется для непровалидированных применений (например, вестерн-блоттинг), валидируйте размер полосы и специфичность соответствующим образом.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам единый доступ к сырьевым материалам для ИВД, техническим услугам и консалтингу — охватывая каждый этап от концепции до клиники. Как партнер в продвижении эпигенетических исследований и разработке диагностики, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела (включая специфичные к ацетилированным формам реагенты, такие как это анти-ацетил-DNMT1 pAb), вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Наша экспертиза в цепочке поставок гарантирует, что вы получаете стабильные, высококачественные сырьевые материалы для ускорения ваших диагностических и исследовательских процессов.